引 言

三氯蔗糖，又名蔗糖素，是一種人工合成甜味劑，以蔗糖為原料經氯代而制得，具有高甜度、低熱量、安全性高、穩定性好等特點。作為低熱量甜味劑或無糖替代品，三氯蔗糖被廣泛應用于食品和飲料中，如無糖可樂、乳酸菌飲品、果脯蜜餞、面包餅干、糖果、堅果等。世界衛生組織 (WHO)、美國食品藥品監督管理局 (FDA) 和歐洲食品安全局 (EFSA) 等權威機構對三氯蔗糖的安全性進行了評估，并確認其在規定的攝入量范圍內是安全的。另外也有研究指出，三氯蔗糖可能會對腸道微生物菌群產生影響，但證據和結論尚不明確；在高溫烹飪（如油炸）時，三氯蔗糖會生成少量的氯丙醇類有毒物質。

GB 2760-2024 進一步擴大三氯蔗糖的使用范圍和最大使用量

2024 年 2 月 8 日，國家衛生健康委聯合市場監管總局發布 47 項新食品安全國家標準和 6 項修改單[1]。時隔十年，《食品安全國家標準 食品添加劑使用標準 (GB 2760)》迎來再次修訂，多種常用食品添加劑調整了使用范圍和最大使用量，如脫氫乙酸、三氯蔗糖等。其中在加工堅果與籽類（食品類別 04.05.02）中三氯蔗糖最大使用量為 1.0 g/kg。

2 月 29 日，國家衛生健康委發布《關于石斛原球莖等 23 種“三新食品”的公告》[2]，其中提出三氯蔗糖在帶殼熟制堅果與籽類（食品類別 04.05.02.01.01）和脫殼熟制堅果與籽類（食品類別 04.05.02.01.02）中擴大使用量，最大限量分別為 4.0 g/kg 和 2.0 g/kg。

表 1 GB 2760-2024 三氯蔗糖允許使用范圍以及最大使用量[4]（點擊查看大圖）

表 2 GB 2760-2014 三氯蔗糖允許使用范圍以及最大使用量[5]（點擊查看大圖）

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GB 5009.298-2023 新國標變化[6] [7]

2023 年 9 月 6 日，國家衛生健康委、市場監管總局聯合印發 2023 年第 6 號公告[3]，發布了 85 項食品安全國家標準，其中包含了三氯蔗糖的檢測標準—GB 5009.298-2023。

1. GB 5009.298-2023 于 2023-09-06 正式發布，2024-03-06 正式實施；

2. GB 5009.298-2023 代替 GB 22255-2014 食品安全國家標準 食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的測定；

3. 相較于 GB 22255-2014，GB 5009.298-2023 增加了第二法 高效液相色譜-串聯質譜法 (HPLC-MS/MS)，修改了第一法 高效液相色譜法 (HPLC-RID&ELSD) 的樣品前處理流程、液相色譜條件及方法檢出限和定量限。

賽默飛新國標應對方案亮點

1.針對第一法 HPLC-RID，賽默飛實驗室采用 Umisil C18 (3) 色譜柱配合最新款示差檢測器—VC-D60 進行方法復現，試驗結果表明：三氯蔗糖 (0.10 mg/mL) 色譜峰形良好，不對稱因子 1.09，柱效優異，理論塔板數 18424；方法靈敏度高，線性低點 (0.02 mg/mL) 信噪比為 83.9；線性范圍 0.02-1.00 mg/mL，線性相關系數 r2≥0.9999；方法重現性和穩定性較好，方法檢出限和定量限均滿足標準要求。流動相須預混脫氣后，單通道等度洗脫。

2.針對第一法 HPLC-ELSD，賽默飛實驗室采用 Hypersil GOLD C18 色譜柱配合電霧式檢測器—CAD 進行方法等效驗證，試驗結果表明：三氯蔗糖 (10.0 μg/mL) 色譜峰形良好，不對稱因子 1.04，柱效優異，理論塔板數 18105；方法靈敏度高，線性低點 (1.00 μg/mL) 信噪比為 99.8；線性范圍 1.00-50.0 μg/mL，線性相關系數 r2≥0.9999；方法檢出限和定量限均優于標準要求，可替代 ELSD 檢測器方法。流動相無須預混，針對復雜基質樣品可梯度洗脫。

3. 針對第二法 HPLC-MS/MS，賽默飛實驗室采用 Accucore C18 色譜柱配合高靈敏度三重四級桿質譜儀—TSQ Altis 進行方法驗證，試驗結果表明：三氯蔗糖質譜參數經優化后，保留良好，響應優異；方法靈敏度高，線性低點 (10.0 ng/mL) 信噪比為 206；線性范圍 10.0-500 ng/mL，線性相關系數 r2≥0.9999；方法檢出限和定量限均優于標準要求，可用于陽性樣品的定性分析或低濃度樣品的定量分析。

GB 5009.298-2023 賽默飛應用解決方案

01 第一法 高效液相色譜法

1.1 HPLC-RID Umisil C18 (3), 5 μm, 4.6×250 mm

圖 1 Thermo Scientific™ Vanquish™ Flex-RID (VC-D60) 液相系統

圖 2 三氯蔗糖標準品溶液分離譜圖及數據 (0.10 mg/mL)

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圖 3 三氯蔗糖標準品溶液校準曲線疊加譜圖 (0.02-1.00 mg/mL)（點擊查看大圖）

圖 4 三氯蔗糖標準品溶液線性最低點 (0.02 mg/mL) 與空白疊加譜圖（點擊查看大圖）

圖 5 三氯蔗糖標準品溶液連續進樣疊加譜圖 (0.05 mg/mL, n=6)（點擊查看大圖）

圖 6 三氯蔗糖標準品溶液與無糖可樂樣品溶液疊加譜圖

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1.2 HPLC-CAD Hypersil GOLD C18, 5 μm, 4.6×250 mm

圖 7 Thermo Scientific™ Vanquish™ Core-CAD 液相系統

圖 8 三氯蔗糖標準品溶液分離譜圖及數據 (10.0 μg/mL)

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圖 9 三氯蔗糖標準品溶液校準曲線疊加譜圖 (1.00-50.0 μg/mL)（點擊查看大圖）

圖 10 三氯蔗糖標準品溶液線性最低點(1.00 μg/mL)與空白疊加譜圖（點擊查看大圖）

圖 11 三氯蔗糖標準品溶液與無糖可樂樣品溶液疊加譜圖

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圖 12 無糖可樂樣品溶液連續進樣疊加譜圖 (n=6)

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02 第二法 高效液相色譜-串聯質譜法

HPLC-MS/MS Accucore C18, 2.6 μm, 4.6×100 mm

圖 13 Thermo Scientific™ Vanquish™ Flex-TSQ Altis™ 液相系統

圖 14 三氯蔗糖標準品溶液提取離子流圖 (100 ng/mL)

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圖 15 三氯蔗糖標準品溶液校準曲線提取離子流圖 (10.0-500 ng/mL)（點擊查看大圖）

圖 16 三氯蔗糖標準品溶液線性最低點 (10.0 ng/mL) 提取離子流圖（點擊查看大圖）

圖 17 三氯蔗糖標準品溶液連續進樣提取離子流圖 (100 ng/mL, n=6)（點擊查看大圖）

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03 GB 5009.298-2023 相關色譜耗材推薦

第一法 高效液相色譜法

第二法 高效液相色譜-串聯質譜法

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